Nature：FBP1酶——肾癌恶化的拦路虎

Nature：FBP1酶——肾癌恶化的拦路虎
来源：生物谷 2014-07-24 09:35


2014年7月24日 讯 /生物谷BIOON/ --近日，来自宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院的研究人员通过研究鉴别出了一种名为FBP1的酶类可以有效阻断肾癌的发展，这种酶类对于调节机体代谢非常关键，它们可以与特殊肾脏细胞的细胞核中的转录因子结合，并且抑制细胞的能量代谢，相关研究成果刊登于国际杂志Nature上。

研究者表示，这种名为FBP1的酶类或许在所有的肾脏肿瘤组织中都是缺失的，而缺失FBP1时的肿瘤细胞会高速产生能量，当FBP1正常发挥功能时失控的肿瘤细胞便会被抑制。肾透明细胞癌（ccRCC）是一种常见的肾癌，主要表现为肾癌细胞的糖原水平升高以及脂肪积累，过量储存的脂质会引发脂滴积累。

ccRCC中异常的脂肪累积源于机体细胞的一系列错误的生化反应，这些名为克雷布斯循环（Kreb's cycle）的反应可以通过碳水化合物、脂肪、以及蛋白质产生能量；然而克雷布斯循环在ccRCC患者机体中是高度激活的，因此往往容易引发脂质产量的增加，肾癌细胞和胞内两种重要蛋白质的改变直接相关，一种是高表达缺氧诱导因子（HIFs）和冯-希佩尔-林道（pVHL）编码蛋白的突变，实际上pVHL的突变在90%的ccRCC都存在，而pVHL可以调节HIFs，从而影响克雷布斯循环的活性。

为了揭示酶类FBP1的表观遗传学特性，研究小组对600多种肿瘤组织进行了代谢酶类的研究分析，发现FBP1在所有的肾癌组织中都出现了缺失，而在正常细胞的细胞质中却可以发现FBP1的表达，在缺失FBP1的细胞中研究者观察到了瓦博格效应(Warburg effect)，即在有氧条件下肿瘤细胞仍主要利用糖酵解来供能，这将导致肿瘤细胞的过度生长，并且使其产生能量的速度是非癌性细胞的200多倍。

FBP1的独特双重功能或许可以帮助解释其为何在ccRCC中普遍存在缺失的现象，FBP1的缺失机制或许可以应用于研究人类癌症发病的根源；下一步研究人员将会通过鉴别机体的其它代谢路径，来测定肾癌细胞和肝癌细胞中代谢产物的含量，从而确定FBP1酶类在疾病发生过程中所扮演的角色，并且为后期进行小鼠模型及临床前研究提供一定的科学依据。（生物谷Bioon.com）



doi:10.1038/nature13557
PMC:
PMID:

Fructose-1,6-bisphosphatase opposes renal carcinoma progression

Bo Li, Bo Qiu, David S. M. Lee, Zandra E. Walton, Joshua D. Ochocki, Lijoy K. Mathew, Anthony Mancuso, Terence P. F. Gade, Brian Keith, Itzhak Nissim & M. Celeste Simon

Clear cell renal cell carcinoma (ccRCC), the most common form of kidney cancer1, is characterized by elevated glycogen levels and fat deposition2. These consistent metabolic alterations are associated with normoxic stabilization of hypoxia-inducible factors (HIFs)3 secondary to von Hippel–Lindau (VHL) mutations that occur in over 90% of ccRCC tumours4. However, kidney-specific VHL deletion in mice fails to elicit ccRCC-specific metabolic phenotypes and tumour formation5, suggesting that additional mechanisms are essential. Recent large-scale sequencing analyses revealed the loss of several chromatin remodelling enzymes in a subset of ccRCC (these included polybromo-1, SET domain containing 2 and BRCA1-associated protein-1, among others)6, 7, 8, 9, indicating that epigenetic perturbations are probably important contributors to the natural history of this disease. Here we used an integrative approach comprising pan-metabolomic profiling and metabolic gene set analysis and determined that the gluconeogenic enzyme fructose-1,6-bisphosphatase 1 (FBP1)10 is uniformly depleted in over six hundred ccRCC tumours examined. Notably, the human FBP1 locus resides on chromosome 9q22, the loss of which is associated with poor prognosis for ccRCC patients11. Our data further indicate that FBP1 inhibits ccRCC progression through two distinct mechanisms. First, FBP1 antagonizes glycolytic flux in renal tubular epithelial cells, the presumptive ccRCC cell of origin12, thereby inhibiting a potential Warburg effect13, 14. Second, in pVHL (the protein encoded by the VHL gene)-deficient ccRCC cells, FBP1 restrains cell proliferation, glycolysis and the pentose phosphate pathway in a catalytic-activity-independent manner, by inhibiting nuclear HIF function via direct interaction with the HIF inhibitory domain. This unique dual function of the FBP1 protein explains its ubiquitous loss in ccRCC, distinguishing FBP1 from previously identified tumour suppressors that are not consistently mutated in all tumours6, 7, 15.

《中国医科大学》 2010年
FBP1和C-MYC在肾透明细胞癌中的表达及意义
刘赫  
【摘要】： 目的 探讨原癌基因c-myc及其远端上游结合蛋白FBP1在肾透明细胞癌中的表达及其临床意义。 方法 采用免疫组化方法对我院2008年7月至12月的肾透明细胞癌标本进行c-myc、FBP1染色分析,同时设置非肿瘤肾组织作染色对照。 结果 在非肿瘤肾组织中c-myc无表达FBP1低表达(5%),在肾透明细胞癌中c-myc及FBP1均有表达(24%,28%)且FBP和c-myc呈正相关性(Pearson相关系数为0.399)。 结论 c-myc远端上游结合蛋白FBP1在肾透明细胞癌中的表达,可进一步激活原癌基因c-myc,可导致肾透明细胞癌发生。

Nature新文章：癌症代谢与侵袭
编辑推荐：
　　来自癌症基因组图谱(TCGA)研究网络的研究者们，在新研究中揭示了肿瘤细胞如何利用代谢能量，与最常见的肾癌形式——肾透明细胞癌(ccRCC)侵袭性之间的联系。他们的研究结果证实在ccRCC肿瘤细胞中正常的代谢被改变，由一种代谢信号通路转变为了利用另一种代谢信号通路。这种代谢转变在某些情况下与肿瘤分期和严重程度相关。
生物通报道  来自癌症基因组图谱(TCGA)研究网络的研究者们，在新研究中揭示了肿瘤细胞如何利用代谢能量，与最常见的肾癌形式——肾透明细胞癌(ccRCC)侵袭性之间的联系。他们的研究结果证实在ccRCC肿瘤细胞中正常的代谢被改变，由一种代谢信号通路转变为了利用另一种代谢信号通路。这种代谢转变在某些情况下与肿瘤分期和严重程度相关。科学家们还发现，一条重要的代谢通路发生突变可能会导致这种癌症的侵袭性增高。
这些研究发现提供了一些关于疾病相关机制和潜在治疗的新认识，了解了某些癌细胞通过将正常的代谢信号通路转变为其他的信号通路，由此为肿瘤细胞提供生长优势的机制。大体上，研究人员发现，在这一疾病中促进肿瘤生长的某些代谢酶发生改变与患者的不良预后相关。这项最新的TCGA研究也支持了过去在不同亚型的肾癌研究中所发现的代谢转换数据。
科学家们利用的数据是由TCGA生成，该合作项目获得了来自美国国立卫生研究院（NIH）下属两个部门：美国国家癌症研究所（NCI）和国家人类基因组研究所（NHGRI）的资金支持。新研究结果在线发表在6月23日的《自然》（Nature）杂志上。
“由于TCGA针对肾肿瘤的特征，以及与患者生存数据之间的联系进行了全面的研究，现在研究人员开始利用这些知识来验证预后标志物，确定这种疾病新的治疗策略，”NIH主管Francis S. Collins博士说。
在这项研究中，科学家调查了近450个ccRCC肿瘤和来自同一患者的匹配正常组织。当他们对癌细胞中某些特异蛋白的表达量进行检测时，发现某些与三羧酸循环（TCA cycle）有关的基因下调，AMPK和PTEN蛋白水平降低；某些磷酸戊糖途径和谷氨酰胺转运基因上调，乙酰辅酶A羧化酶（acetyl-CoA carboxylase）蛋白表达升高，以及miR-21和GRB10启动子甲基化发生改变，这些均与患者的不良预后有关
NCI 主管Harold Varmus 博士说：“较早之前科学家们鉴别其他类型癌症的特征所获得的研究发现，为我们提供了一些重要的线索，来了解如何针对这些癌症设计更好治疗。TCGA对肾透明细胞癌的新分析结果，为我们提供了一种解释：即某些基因突变是如何改变染色体化学性质，导致酶水平变化，改变细胞代谢，从多方面影响临床结果的。这些研究发现将刺激生成一些关于其他致命性癌症治疗的新想法。”
除揭示了代谢转换与肿瘤侵袭之间的联系，TCGA研究网络的科学家们还发现，在某些情况下，代谢转换有可能是由于PI3K细胞信号通路改变所引起，这一信号通路帮助调控了细胞代谢。研究者们在肿瘤细胞中观察到PI3K信号通路基因及它的调控子发生了大量的改变，包括蛋白质编码区域DNA突变，以及影响基因表达的其他改变。他们发现在29%的肿瘤样品中PI3K信号通路，或是它的伙伴信号通路AKT和mTOR都存在有这样的改变。AKT和mTOR对于调控细胞代谢同样至关重要。
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这些改变所造成的影响表明了PI3K/AKT/mTOR信号通路的重要性。研究人员发现，某些激活肿瘤抑制基因的因子减少。同时，一些因子被阻断，导致抑制PI3K信号通路的基因无法开启。这两种改变都促进了PI3K/AKT/mTOR信号通路的活性。这些结果表明，该信号通路有潜力作为抑制剂药物的治疗靶点。
研究的领导者之一、NCI泌尿肿瘤学分部主管W. Marston Linehan博士认为这些研究结果具有几方面的重要意义。“发现这些侵袭性肿瘤中发生了一种代谢转换，可能为开发出大量的新方法治疗晚期肾癌患者奠定基础。”
（生物通：何嫱）

感谢各位的信息，对肿瘤的认识在一步步的深入，相信总有一天人类会攻克这难关！希望这些理论早日在临床上应用，使大家受益！

《南京医科大学》 2012年 加入收藏 获取最新
PGE_2通过FBP1调控肝癌细胞生长机制的研究
马娟  
【摘要】：研究背景： 前列腺素E_2（PGE_2）是花生四烯酸经过COX-2催化的代谢产物，能够显著促进多种肿瘤的增殖、侵袭和转移，但是其确切的调控机制尚不清楚。 PGE_2主要通过四种细胞膜上的G蛋白偶联受体发挥作用，这四种（Eprostanoid, EP）受体分别是EP1，EP2，EP3和EP4。大鼠和人胚肾细胞（HEK293细胞）EP受体转染实验表明，EP1受体主要与Gq蛋白相偶联，引起细胞内Ca2+浓度上调以及PKC（蛋白激酶C）激活；EP2和EP4受体主要与Gs蛋白相偶联，激活腺苷酸环化酶，导致细胞内cAMP浓度上升，诱导PKA激活；EP3则与Gi蛋白相偶联，抑制腺苷酸环化酶，导致细胞内cAMP浓度下降。PGE_2通过EP受体调控肿瘤细胞生长的具体通路靶点和机制，目前尚不十分清楚。 FUSE结合蛋白(far upstream element binding protein, FBP)家族包括三种调控蛋白，分别是FBP1、FBP2和FBP3。FUSE结合蛋白可优先结合到单链DNA和RNA序列，作为转录因子，调控基因转录稳定性，促进c-myc等癌基因的表达，反之FBP1功能的下调可抑制c-myc等癌基因的表达。有报道，FBP1蛋白水平增高可显著诱导肝癌细胞增殖。 我们前期工作表明，PGE_2和EP3受体激动剂可上调肝癌细胞CCLP1的FBP1蛋白水平，且促进肝癌细胞生长。说明PGE_2可能通过EP3受体通路上调FBP1而促进肝癌细胞的生长，但具体调控机制尚不清楚，目前也未见这方面的报道。 近年来有报道在肿瘤中EP3受体还可与Gs蛋白偶联，激活腺苷酸环化酶AC，导致细胞内cAMP浓度升高，促进肿瘤的生长、血管生成及转移。 文献报道cAMP可激活蛋白激酶A(PKA)通路。PKA激活后有可能抑制TGF-的活性，而TGF-/Smad通路可抑制肿瘤的生长和转移，因而阻断TGF-β/Smad信号通路有可能促进肿瘤细胞的生长。 还有报道，TGF-β抑制细胞生长的作用与JTV1蛋白有关。JTV1，也叫做p38或AIMP2，是胞浆多氨酰基t-RNA合酶复合物（ARS）的结构亚基。JTV1水平增高可抑制癌细胞的增殖。有关Ⅱ型肺泡上皮的研究表明TGF-β可诱导JTV1蛋白水平的升高，并促使其从胞浆转位至胞核而发挥作用。 JTV1在细胞核调节FBP1的泛素化，JTV1的过表达可促进FBP1的泛素化降解；JTV1和FBP1相互作用是FBP1发生泛素化的必需条件。因而，TGF-β有可能通过上调JTV1的蛋白水平，并促使其从胞浆转位至胞核，增强和FBP1的相互作用，诱导FBP1的泛素化，从而引起FBP1的降解。 综上所述，根据人们目前对EP3受体和FBP1的认识及前期实验的结果，我们提出如下科学假说：PGE_2激活EP3受体，EP3受体与Gs蛋白偶联，激活cAMP-PKA，而抑制TGF-β的活性，从而下调JTV1的蛋白水平及JTV1和FBP1的相互作用，抑制FBP1的泛素化降解，从而上调肝癌细胞FBP1蛋白水平，进而促进肝癌细胞的生长。 在本研究中，拟通过EP3受体激动与抑制、过表达与RNA干扰、信号转导通路靶点干预、免疫共沉淀、免疫印迹等方法，研究PGE_2通过EP3受体通路抑制FBP1泛素化降解，上调FBP1蛋白水平，从而促进肝癌细胞生长的机制，以证实上述假说。有关这方面的研究工作国内外尚未见报道。 本研究的结果有助于人们更好地认识PGE_2促进肿瘤细胞生长的机制，并且对筛选新的抗肿瘤靶点具有重要的理论意义和实用价值。 研究目的： 1.明确肝癌细胞中EP3受体的表达情况。 2.明确PGE_2通过EP3受体对肝癌细胞生长的调控作用。 3.明确PGE_2通过EP3受体上调FBP1蛋白水平而促进肝癌细胞的生长。 4.明确PGE_2激活EP3受体，EP3受体与Gs蛋白偶联，激活cAMP-PKA，而抑制TGF-的活性，从而下调JTV1的蛋白水平及JTV1和FBP1的相互作用，抑制FBP1的泛素化降解，从而上调肝癌细胞FBP1蛋白水平，进而促进肝癌细胞的生长。 研究方法： 1.常规方法培养肝细胞癌HUH-7、Hep3B、HepG2细胞及胆管细胞癌HuCCT1、CCLP1细胞、SG231细胞。 2.用Real-Time PCR实验检测肝癌细胞EP3受体剪接体亚型的表达类型。 3.用WST实验检测EP3受体激动剂Sulprostone、Gi蛋白抑制剂百日咳毒素PTX，Gs通路的腺苷酸环化酶AC抑制剂SQ22536和PKA抑制剂H89对肝癌细胞生长的影响。 4.二维电泳、质谱分析EP3受体激动后，下游蛋白FBP1水平的变化。 5.用EP3受体抑制剂L-798106、EP3受体siRNA、PGE_2和EP3受体激动剂Sulprostone处理细胞，Western blot实验检测FBP1蛋白水平的变化。 6.用ELISA试剂盒检测PGE_2、EP3受体激动剂Sulprostone对细胞内cAMP水平的影响。 7.用PKA抑制剂H89、腺苷酸环化酶AC激动剂Forskolin、cAMP拟似物db-cAMP、EP3受体激动剂Sulprostone和PGE_2刺激细胞，Western blot实验检测磷酸化Smad2的蛋白水平的变化。 8.用TGF-β_11、腺苷酸环化酶AC激动剂Forskolin、cAMP拟似物db-cAMP、EP3受体激动剂Sulprostone和PGE_2刺激细胞，Western blot实验检测磷酸化Smad2的蛋白水平的变化。 9.用TGF-β_11、腺苷酸环化酶AC激动剂Forskolin、cAMP拟似物db-cAMP、EP3受体激动剂Sulprostone和PGE_2刺激细胞， Western blot和免疫共沉淀实验检测FBP1的蛋白水平、JTV1的蛋白水平以及JTV1和FBP1的相互作用及FBP1的泛素化降解。 10.用PGE_2、EP3受体激动剂Sulprostone、腺苷酸环化酶AC抑制剂SQ22536和PKA抑制剂H89刺激细胞，Western blot和免疫共沉淀实验检测FBP1的蛋白水平、JTV1的蛋白水平以及JTV1和FBP1的相互作用及FBP1的泛素化降解。 研究结果： 1. Real-Time PCR实验检测肝癌细胞，结果表明肝细胞癌HUH-7、Hep3B、HepG2细胞及胆管细胞癌HuCCT1、CCLP1细胞表达EP3-4，EP3-5，EP3-6和EP3-7四种剪接体亚型，而胆管细胞癌SG231细胞表达EP3-4，EP3-5，EP3-7三种剪接体亚型。 2.用10μM EP3受体激动剂Sulprostone和50nM Gi蛋白抑制剂百日咳毒素PTX处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞，WST实验检测结果表明EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“Sulprostone”处理组和对照组相比，细胞生长率从100%增加至135.17%（P 0.01），空载细胞未发生明显变化；而“Sulprostone+PTX”处理组和“Sulprostone”处理组相比，并未发生明显变化。用10μM EP3受体激动剂Sulprostone、50μM腺苷酸环化酶AC抑制剂SQ22536和10μM PKA抑制剂H89处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞，WST实验检测结果表明EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“Sulprostone”处理组和对照组相比，细胞生长率从100%增加至135.17%（P 0.01）；“Sulprostone+H89”处理组和“Sulprostone”处理组相比，细胞生长率从135.17%降至99.4%（P 0.01）；“Sulprostone+SQ22536”处理组和“Sulprostone”处理组相比，细胞生长率从135.17%降至116.9%（P 0.01），空载细胞未发生明显变化。 3.用10μMPGE_2和10μMEP3受体激动剂Sulprostone处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞，FBP1蛋白水平的上调呈明显的时间依赖性，在处理时间1h时，EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞FBP1的蛋白水平分别是对照组的1.43倍（P 0.01）和1.72倍（P 0.05）；空载细胞FBP1蛋白水平未发生明显改变。用10μM PGE_2和10μM EP3受体抑制剂L-798106处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞，EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“PGE_2”处理组的FBP1蛋白水平是对照组的1.68倍（P 0.05），“PGE_2+L-798106”处理组下降至“PGE_2”处理组的0.57倍（P 0.05），空载细胞FBP1蛋白水平未发生明显改变。将EP3-4siRNA转染至EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞，用10μMPGE_2和10μMEP3受体激动剂Sulprostone处理该细胞，并设置阴性对照干扰组。EP3-4siRNA转染的细胞“PGE_2”和“Sulprostone”处理组的FBP1蛋白水平和溶剂对照组相比，未发生明显变化；而阴性对照干扰组，“PGE_2”和“Sulprostone”处理组的FBP1蛋白水平分别是溶剂对照组的1.46倍和2.02倍（P 0.05）。 4.用10μMPGE_2和10μMEP3受体激动剂Sulprostone处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞，EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“PGE_2”和“Sulprostone”处理组的cAMP水平分别比对照组升高了248.56%和99.42%（P 0.01），空载细胞未发生明显变化。 5.用10μMPKA抑制剂H89、10μM腺苷酸环化酶AC激动剂Forskolin、100μM cAMP拟似物db-cAMP、10μM EP3受体激动剂Sulprostone和10μMPGE_2处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞，EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“H89”处理组的磷酸化Smad2的蛋白水平是对照组的1.49倍（P 0.05），“H89+Forskolin”、“H89+db-cAMP”、“H89+Sulprostone”和“H89+PGE_2”处理组的磷酸化Smad2的蛋白水平分别降至“H89”处理组的0.51倍、0.74倍、0.68倍和0.62倍（P 0.05），空载细胞未发生明显变化。 6.用2ng/ml TGF-β_1、10μM腺苷酸环化酶AC激动剂Forskolin、100μMcAMP拟似物db-cAMP、10μM EP3受体激动剂Sulprostone和10μM PGE_2处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞，EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“TGF-β_1”处理组的磷酸化Smad2的蛋白水平是对照组的2.26倍（P0.05），“TGF-β_1+Forskolin”、“TGF-β_1+db-cAMP”、“TGF-β_1+Sulprostone”和“TGF-+PGE_2”处理组的磷酸化Smad2的蛋白水平分别降至“TGF-β_1”处理组的0.66倍、0.60倍、0.60倍和0.70倍（P 0.05），空载细胞未发生明显变化。 7.用2ng/ml TGF-β_1、10μM腺苷酸环化酶AC激动剂Forskolin、100μMcAMP拟似物db-cAMP、10μM EP3受体激动剂Sulprostone和10μM PGE_2处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞，EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“TGF-β_1”处理组的FBP1蛋白水平是对照组的0.63倍（P 0.05），“TGF-β_1+Forskolin”、“TGF-+db-cAMP”、“TGF-β_1+Sulprostone”和“TGF-β_1+PGE_2”处理组的FBP1蛋白水平分别升至“TGF-β_1”处理组的1.90倍、1.56倍、1.84倍和1.62倍（P 0.05）；“TGF-β_1”处理组的JTV1蛋白水平是对照组的1.48倍（P 0.05），“TGF-β_1+Forskolin”、“TGF-β_1+db-cAMP”、“TGF-β_1+Sulprostone”和“TGF-β_1+PGE_2”处理组的JTV1蛋白水平分别降至“TGF-β_1”处理组的0.46倍、0.55倍、0.56倍和0.55倍（P0.05）；空载细胞未发生明显变化。 8.用2ng/ml TGF-β_1、10μM腺苷酸环化酶AC激动剂Forskolin、100μMcAMP拟似物db-cAMP、10μM EP3受体激动剂Sulprostone和10μM PGE_2处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞，EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“TGF-β_1”处理组的JTV1和FBP1的相互作用是对照组的1.47倍（P0.05），“TGF-+Forskolin”、“TGF-+db-cAMP”、“TGF-+Sulprostone”和“TGF-β_1+PGE_2”处理组的JTV1和FBP1的相互作用分别降至“TGF-”处理组的0.41倍、0.52倍、0.41倍和0.37倍（P0.05）；空载细胞未发生明显变化。用2ng/ml TGF-β_1、10μM腺苷酸环化酶AC激动剂Forskolin、100μM cAMP拟似物db-cAMP、10μM EP3受体激动剂Sulprostone和10μM PGE_2处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞，EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“TGF-β_1”处理组的FBP1的泛素化水平是对照组的1.76倍（P 0.05），“TGF-β_1+Forskolin”、“TGF-β_1+db-cAMP”、“TGF-β_1+Sulprostone”和“TGF-β_1+PGE_2”处理组的FBP1的泛素化水平分别降至“TGF-β_1”处理组的0.59倍、0.64倍、0.43倍和0.67倍（P0.05）；空载细胞未发生明显变化。 9.用10μMEP3受体激动剂Sulprostone、50μM腺苷酸环化酶AC抑制剂SQ22536和10μM PKA抑制剂H89处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞， EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“Sulprostone”处理组的FBP1蛋白水平是对照组的1.82倍（P 0.05），“Sulprostone+H89”和“Sulprostone+SQ22536”处理组的FBP1蛋白水平分别降至“Sulprostone”处理组的0.58倍和0.53倍（P 0.05）；“Sulprostone”处理组的JTV1蛋白水平是对照组的0.60倍（P 0.05），“Sulprostone+H89”和“Sulprostone+SQ22536”处理组的JTV1蛋白水平分别升至“Sulprostone”处理组的1.36倍和1.66倍（P 0.05）；空载细胞未发生明显变化。 10.用10μM PGE_2、50μM腺苷酸环化酶AC抑制剂SQ22536和10μM PKA抑制剂H89处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞， EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“PGE_2”处理组的FBP1蛋白水平是对照组的1.73倍（P 0.05），“PGE_2+H89”和“PGE_2+SQ22536”处理组的FBP1蛋白水平分别降至“PGE_2”处理组的0.73倍和0.80倍（P 0.05）；“PGE_2”处理组的JTV1蛋白水平是对照组的0.65倍（P 0.05），“PGE_2+H89”和“PGE_2+SQ22536”处理组的JTV1蛋白水平分别升至“PGE_2”处理组的1.61倍和1.94倍（P 0.05）；空载细胞未发生明显变化。 11.用10μM EP3受体激动剂Sulprostone、50μM腺苷酸环化酶AC抑制剂SQ22536和10μM PKA抑制剂H89处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞， EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“Sulprostone”处理组的FBP1和JTV1的相互作用是对照组的0.36倍（P 0.05），“Sulprostone+H89”和“Sulprostone+SQ22536”处理组的FBP1和JTV1的相互作用分别升至“Sulprostone”处理组的3.31倍和3.39倍（P 0.05）；“Sulprostone”处理组的FBP1泛素化水平是对照组的0.69倍（P 0.05），“Sulprostone+H89”和“Sulprostone+SQ22536”处理组的FBP1泛素化水平分别升至“Sulprostone”处理组的1.77倍和1.79倍（P 0.05）；空载细胞未发生明显变化。 12.用10μM PGE_2、50μM腺苷酸环化酶AC抑制剂SQ22536和10μM PKA抑制剂H89处理EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞及空载细胞， EP3-4稳定表达细胞系CCLP1细胞“PGE_2”处理组的FBP1和JTV1的相互作用是对照组的0.56倍（P 0.05），“PGE_2+H89”和“PGE_2+SQ22536”处理组的FBP1和JTV1的相互作用分别升至“PGE_2”处理组的2.21倍和2.34倍（P 0.05）；“PGE_2”处理组的FBP1的泛素化水平是对照组的0.70倍（P 0.05），“PGE_2+H89”和“PGE_2+SQ22536”处理组的FBP1的泛素化水平分别升至“PGE_2”处理组的1.53倍和1.46倍（P 0.05）；空载细胞未发生明显变化。 研究结论： PGE_2激活EP3受体， EP3受体与Gs蛋白偶联，激活cAMP-PKA，而抑制TGF-的活性，下调JTV1的蛋白水平及JTV1和FBP1的相互作用，抑制FBP1的泛素化降解，从而上调肝癌细胞FBP1蛋白水平，进而促进肝癌细胞的生长。
【关键词】：FBP1 PGE_2 EP3 受体 肝癌细胞 生长

研究结论： PGE_2激活EP3受体， EP3受体与Gs蛋白偶联，激活cAMP-PKA，而抑制TGF-的活性，下调JTV1的蛋白水平及JTV1和FBP1的相互作用，抑制FBP1的泛素化降解，从而上调肝癌细胞FBP1蛋白水平，进而促进肝癌细胞的生长。

该研究结论似乎是FBP1蛋白水平的上调促进肝癌细胞的生长？

曲阜人 发表于 2014-8-5 22:22
研究结论： PGE_2激活EP3受体， EP3受体与Gs蛋白偶联，激活cAMP-PKA，而抑制TGF-的活性，下调JTV1的蛋白水 ...

果糖-1,6-二磷酸酶（FBP1）

"肾透明细胞癌（ccRCC）是一种常见的肾癌，主要表现为肾癌细胞的糖原水平升高以及脂肪积累，过量储存的脂质会引发脂滴积累。ccRCC中异常的脂肪累积源于机体细胞的一系列错误的生化反应，这些名为克雷布斯循环（Kreb's cycle）的反应可以通过碳水化合物、脂肪、以及蛋白质产生能量；然而克雷布斯循环在ccRCC患者机体中是高度激活的，因此往往容易引发脂质产量的增加."
血糖、肥胖，ccRCC当注意！